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组织透明化服务

发表时间:2024-07-12 11:13

组织透明化多维荧光成像一站式解决方案


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一、组织透明化

生物组织含有水、脂质和蛋白质等多种分子造成光散射,细胞中各类色素造成光吸收,使得组织不透明而无法用显微镜观察深部。组织透明化技术是通过生化试剂去除造成光散射和光吸收的组分,让组织达到折射率均一、光学均质性。目前我们使用三类组织透明化技术,包括基于水溶性的透明化法(CUBIC,SeeDB等);基于有机溶剂的透明化法(PEGASOS,iDISCO等);基于水凝胶的透明化方法(CLARITY,SHELD等),能透明化处理多种生物组织样品(如:脑、肝、肺、肾、乳腺、骨骼,肿瘤等器官和组织),并维持组织内完整的细胞结构和分子组成。同时,利用MIT最新研发的SmartLabel智能荧光标记电泳仪,可以实现完整组织和器官的均匀荧光标记。

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组织透明化小鼠脑,左侧为3*3*5mm脑组织块,右侧为小鼠全脑

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二、光片显微镜扫描

我们配有布鲁克公司的Luxendo MuVi SPIM光片显微镜,该光片显微镜利用动态线扫描高斯光束,生成均匀的超薄光束,快速连续的扫描透明化样品,无需将鼠脑切片就可以完整获取整个小鼠大脑的完整荧光图像,比激光共聚焦和双光子显微镜成像深度更深、范围更大,速度更快,光漂白更小。实际测试约3mm x 4mm x5mm样品,以<0.5μm/像素,1μm/z step的水平拍照,整个拍照时间只需要不到1小时即可完成,重构及拼接后清晰度很高,完全可以达到神经投射追踪的要求,而且拍照后样品仍然完好可以继续使用。使用该显微镜在约0.65x0.65x3微米分辨率拍照完整鼠脑时间大约只用几十分钟,时间效率相比共聚焦可以实现数百倍的提高。


光片显微镜

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三、图像三维重构与数据处理

基于购买的Imaris高级图像处理软件及联合开发的数据分析软件,可以快速进行原始数据的整合,拼接;可实现完整器官或者局部区域的单色或多色三维重构;针对特定区域还可进行定量分析、图像分割等处理;能对脑区、核团、神经元等进行解剖结构的配准。

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Thy1-gfp转基因小鼠全脑透明化光片显微镜成像,imaris软件三维重构

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小鼠胰腺组织的神经腺体导管三维透明化光片显微镜成像,imaris软件三维重构


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